技術(shù)文章 / article
采用肺炎衣原體試劑盒測(cè)試的試驗(yàn)步驟
2019-08-07 瀏覽次數(shù)：1952
肺炎衣原體試劑盒可通過(guò)檢測(cè)IgM抗體來(lái)早期診斷肺炎衣原體現(xiàn)癥感染，僅用于體外診斷。肺炎衣原體(TWAR)是一種新出現(xiàn)的有傳染性的因子，可引起一系列臨床表現(xiàn)，包括上呼吸道和下呼吸道感染。衣原體肺炎感染一般是溫和的、無(wú)癥狀的，然而，肺炎衣原體感染可能會(huì)引起一些嚴(yán)重的疾病如：咽炎、竇炎、急性支氣管炎和社區(qū)獲得性肺炎。如果未檢測(cè)出和未進(jìn)行治療，此感染可能會(huì)導(dǎo)致長(zhǎng)期持久的疾病，數(shù)據(jù)顯示了肺炎衣原體感染和慢性疾病的關(guān)聯(lián)。
采用肺炎衣原體試劑盒測(cè)試的試驗(yàn)步驟：
1.配制洗滌液：1瓶濃縮洗滌液加480ml蒸餾水。
2.待試劑盒平衡至室溫后，待測(cè)標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液按1∶40稀釋，即取5μl血清與200μl標(biāo)本稀釋液混合。
3.各加100μl陽(yáng)性、陰性對(duì)照及已稀釋待測(cè)標(biāo)本上清液于相應(yīng)孔中，空白對(duì)照孔加100μl標(biāo)本稀釋液。
4.蓋好反應(yīng)板，37℃孵育30分鐘。
5.甩盡板中液體，用200—300μl洗滌液洗5次，每次均需拍干。
6.每孔加酶聯(lián)物兩滴或100μl，蓋好反應(yīng)板，置37℃30分鐘。
7.甩盡板中液體，洗5次，每次拍干。
8.加底物A及B各一滴或各50μl，混勻，37℃15分鐘。
9.目測(cè)：在白色背景下觀察各孔顯色的情況。有明顯藍(lán)色者為陽(yáng)性（明顯藍(lán)于陰性孔），無(wú)色者為陰性（和陰性相近）。
10.酶標(biāo)儀檢測(cè)：每孔加終止液1滴（50μl）輕拍混勻，用酶標(biāo)儀（450nm波長(zhǎng)）測(cè)定各孔OD值。
本試驗(yàn)結(jié)果需結(jié)合臨床表現(xiàn)、病史及其他診斷結(jié)果方可采取適當(dāng)臨床處理。肺炎衣原體試劑盒已含有消除干擾因子之物質(zhì)，但仍可能有RF強(qiáng)陽(yáng)性之標(biāo)本難以盡除干擾，如某標(biāo)本幾項(xiàng)均為IgM陽(yáng)性，應(yīng)用RF試劑盒檢測(cè)，如為RF陽(yáng)性，建議可排除IgM陽(yáng)性。
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