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糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)試劑盒說明書
2018-05-08 瀏覽次數(shù)：4923
瑞士 BÜHLMANN 公司生產(chǎn)的糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)試劑 盒（酶聯(lián)免疫法）用于定量檢測(cè)人糞便中的鈣衛(wèi)蛋白 （MRP8/14; S100A8/S100A9）。
糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法，基于不同位點(diǎn)的兩種單 克隆抗-人鈣衛(wèi)蛋白抗體。標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和稀釋后的待測(cè) 樣本加入到具有高親和力的單克隆抗-人鈣衛(wèi)蛋白抗體包被的微孔板微孔內(nèi)。在*次孵育步驟中，樣本中鈣衛(wèi)蛋白被 固相抗體捕獲。加入酶聯(lián)物后第二次孵育時(shí)，形成以下復(fù)合 體：捕獲抗體-人鈣衛(wèi)蛋白-酶標(biāo)抗體結(jié)合物。接著加入 TMB 底物進(jìn)行顯色，加入酸液終止液終止顯色反應(yīng)，溶液變成黃 色。黃色亮度與樣本中鈣衛(wèi)蛋白濃度成正比。zui后在酶標(biāo)儀 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度。做出標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)相應(yīng) OD 值的 標(biāo)準(zhǔn)曲線，在其上計(jì)算出樣本濃度。
糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)試劑盒ELISA 過程：
為獲取可重復(fù)的準(zhǔn)確結(jié)果，清洗步驟是*的。洗滌液 加入到每個(gè)檢測(cè)孔后，每次必須至少孵育 20 秒，洗板次數(shù) 也要按照要求進(jìn)行。 如使用自動(dòng)洗板機(jī)，強(qiáng)烈建議使用“板模式”，可縮短孵育 時(shí)間。 檢測(cè)板震蕩參數(shù)：400-600 轉(zhuǎn)/分（<10HZ）。 建議標(biāo)準(zhǔn)品、校準(zhǔn)品和標(biāo)本做復(fù)孔，每次實(shí)驗(yàn)都必須使用本 次新做的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 如果某個(gè)未知樣本的檢測(cè)到的濃度比zui高的標(biāo)準(zhǔn)品濃度還 要高，則需要將這個(gè)未知樣本進(jìn)一步稀釋并重新檢測(cè)，由此 產(chǎn)生的稀釋系數(shù)必須體現(xiàn)到計(jì)算結(jié)果中。
糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)試劑盒ELISA樣本采集和儲(chǔ)存：
提取程序需要的糞便樣本量為 50-100mg 將糞便樣本放入試管中，在 2-8 度可儲(chǔ)存 6 天 糞便樣本冷凍后，鈣衛(wèi)蛋白的濃度會(huì)略有上升。因此，如需 長(zhǎng)期保持，建議將提取物儲(chǔ)存于-20 度，可保存至少 4 個(gè)月。 重要提示：樣本收集裝置不可含有其它生物或化學(xué)成分。
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